基本概念

熱原指臨床上引起哺乳動物發熱反應的物質，是注射用原料藥及制劑生產廠通常面臨的問題。污染可能來源于原輔料、水、試劑、車間環境、設備等。含有熱原的藥品進入人體，會使人體出現發冷、寒戰、體溫升高、身痛、出汗、惡心嘔吐等不良反應。有時體溫可升至40°C，嚴重者出現昏迷、虛脫，甚至有生命危險。

法規

中國GMP 無菌藥品附錄^[1]

FDA CFR 211 子部分 E--組件和藥品容器和瓶蓋的控制^[2]

第 211.94 節 藥品容器和瓶蓋。
（c） 藥品容器和封蓋必須清潔，并在藥物性質表明的情況下，進行滅菌和加工以去除熱原特性，以確保其適合其預期用途。這種脫熱原過程應得到驗證。
（d） 藥品容器和封蓋應編寫并遵循標準或規格、試驗方法，并在指明的情況下，編寫并遵循清潔、滅菌和處理方法，以去除熱原特性。

FDA CFR 211 子部分 H--持有和分銷^[3]

Sec. 211.165 測試和發布以進行分銷。
（a） 對于每批藥品，在釋放之前，應有適當的實驗室確定是否令人滿意地符合藥品的最后規格，包括每種活性成分的特性和強度。如果對特定批次的短壽命放射性藥物進行無菌和/或熱原測試，只要盡快完成此類測試，則可以在完成無菌和/或熱原測試之前釋放這些批次。
第211.167節 特殊測試要求。
（a） 對于每批聲稱無菌和（或）無熱原的藥品，應進行適當的實驗室測試，以確定是否符合這些要求。考試程序應采用書面形式，并應遵循。
第 211.170 節 保留樣本。
（a） 應保留適當確定的儲備樣品，該樣品應代表每批每有效成分。儲備樣品至少是確定活性成分是否符合其既定規格所需的所有測試所需數量的兩倍，無菌和熱原測試除外。保存時間如下：
（b）適當確定的、代表每批或每批藥品的儲備樣品，應當在與產品標簽相符的條件下保存和儲存。儲備樣品應儲存在藥品銷售的同一立即容器封閉系統中，或儲存在具有基本相同特性的系統中。儲備樣品至少是進行所有必需測試所需數量的兩倍，但無菌和熱原除外。除本節第（b）（2）款所述藥品外，應至少每年對按可接受的統計程序選擇的代表性樣品批次或批次中的保留樣品進行一次目視檢查，以發現變質的證據，除非目視檢查會影響保留樣品的完整性。任何儲備樣品劣化的證據應根據211.192進行調查。檢查結果應與藥品上的其他穩定性數據一起記錄和保存。不需要保留壓縮醫用氣體的儲備樣品。

歐盟GMP附錄1無菌藥品的制造^[4]

原則
無菌產品的制造受到特殊要求的約束，以盡量減少微生物污染以及顆粒物和熱原污染的風險。這在很大程度上取決于有關人員的技能、培訓和態度。質量保證尤為重要，這種類型的制造必須嚴格遵循精心建立和驗證的制備方法和程序。不得將唯一依賴無菌或其他質量方面放在任何終端過程或成品測試上。
97.所使用的過程應包括腔室內的空氣循環和保持正壓以防止非無菌空氣進入。任何進入的空氣都應通過HEPA過濾器。如果該過程還旨在去除熱原，則應使用使用內毒素的激發試驗作為驗證的一部分。

實施指導

熱原污染途徑
熱原污染途徑主要有四個途徑：注射用水；從原輔料中帶入；從容器、用具、管道和裝置等帶入；制備過程中的污染。參考藥品GMP指南 無菌制劑 3.3.1 內毒素控制^[6]

除熱原工藝
中國藥典中要求除熱原需滿足250°C，45 min，根據FH計算公式： FH=10（T2-T1）/Z=10（250-170）/54=1365
各干熱滅菌器使用廠家可根據藥典推薦條件進行理論推算，但應根據實際驗證數據確認設備除熱原性能、設定日常使用時的滅菌周期時間。參考藥品GMP指南 無菌制劑 10.3 干熱滅菌^[7]

中藥注射劑熱原污染質量缺陷
因滅菌不徹底或包裝不嚴或藥材質量不佳，常會帶入熱原。因此，嚴格把好原料的質量關，制備好的中間體注意防止微生物污染。必要時在投料前可做熱原檢查。玻璃器皿熱原的方法可采用經洗滌潔凈后，在250°C，30分鐘或300°C，5分鐘以上處理破壞熱原；常用強酸強堿浸泡玻璃、塑料等容器，以除去熱原；在配制注射劑時加入0.1%～0.5%(g/ml)的活性炭吸附，煮沸并攪拌15分鐘以上，但應考察活性炭吸附對有效成分的影響等。參考藥品GMP指南 無菌制劑 附錄四 2 中藥注射劑GMP的實施指南^[8]

玻璃容器的干熱去熱原和除熱原驗證
容器干熱去熱原操作，可以滅活生物和降解內毒素。根據容器大小，材質，質量以及裝載結構設置具體的滅菌/去熱原的溫度和時間。大規模的生產中，通常的方法是容器通過輸送機械進行自動流轉，采用一體化的清洗設備和隧道烘箱，對容器進行清洗和去熱原操作。膠塞的去熱原可通過熱的注射用水反復沖洗來實現的。對于不銹鋼或者玻璃等可耐受高溫的材質制造的容器具，可采用干熱滅菌的方法除去熱原。也可采取用熱注射用水清洗去除熱原，然后進行濕熱滅菌。干熱滅菌和除熱原的驗證應包括適當的熱分布和熱穿透研究，以及使用最差條件下的操作環節、容器特征（如大容量容器）和特殊裝載方式，以模擬最差條件下生產狀態測試。必要時，多次注射用水沖洗可有效地去除這些容器的熱原。參考藥品GMP指南 無菌制劑 5.2 玻璃容器^[9]和藥品GMP指南 無菌制劑 5.4 工器具^[10]

1 中國GMP 無菌藥品附錄

2 FDA CFR 211 子部分 E--組件和藥品容器和瓶蓋的控制

3 FDA CFR 211 子部分 H--持有和分銷

4 歐盟GMP附件1無菌藥品生產

5 歐盟GMP附件2 2012年生物活性物質和醫藥產品的制造

6 藥品GMP指南 無菌制劑 3.3.1 內毒素控制

7 藥品GMP指南 無菌制劑 10.3 干熱滅菌

8 藥品GMP指南 無菌制劑 附錄四 2 中藥注射劑GMP的實施指南

9 藥品GMP指南 無菌制劑 5.2 玻璃容器

10 藥品GMP指南 無菌制劑 5.4 工器具

11 藥品GMP指南 水系統 6.1 水的化學與微生物基礎知識